Caractéristiques de l'apoptose de cellules en cultureen culture
Qu'observe-t-on au cours de l'apoptose dans les cellules en culture ?
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On étudie la répartition cellulaire du cytochrome c lors de l'apoptose
Localisation normale du cytochrome c
Quelle est la localisation du cytochrome c dans une cellule saine ?
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Le cytochrome c est un acteur de la chaîne respiratoire des mitochondries. Il se trouve dans l'espace inter-membranaire des mitochondries.
Repérage du cytochrome c
Comment le cytochrome c est-il visualisé dans les cellules ?
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L'utilisation d'un cytochrome c directement fluorescent permet une observation in vivo, contrairement à l'immuno-marquage qui nécessite la fixation préalable des cellules.
Marquage d'une cellule saine
Comment apparaît la fluorescence liée au cytochrome dans une cellule saine ?
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Explication
Que traduit cette répartition de la fluorescence ?
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Ces points de plus forte intensité montrent que les molécules de cytochrome c sont regroupées au sein de structures disséminées dans le cytoplasme. Il s'agit des mitochondries.
Marquage d'une cellule apoptotique
Comment apparaît la fluorescence liée au cytochrome dans une cellule apoptotique ?
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Explication
Que traduit cette répartition de la fluorescence ?
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On a un aspect diffus de la fluorescence sur l'ensemble de la cellule. La fluorescence s'est répartie de manière homogène dans le cytoplasme. Les mitochondries on donc relargué le cytochrome c dans le cytoplasme.
On étudie la répartition cellulaire de la phosphatidylsérine, un phospholipide membranaire, lors de l'apoptose.
Localisation normale de la phosphatidylsérine
Quelle est la localisation de la phosphatidylsérine dans une cellule saine ?
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Localisation de la phosphatidylsérine dans une cellule apoptotique
Où retrouve-t-on la phosphatidylsérine dans une cellule apoptotique ?
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Mise en évidence expérimentale
Comment le flip-flop de la phosphatidylsérine est-il mis en évidence ?
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Rôle physiologique de la phosphatidylsérine
Quel est le rôle de la phosphatidylsérine dans l'organisme ?
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La phosphatidylsérine exposée à la surface des cellules apoptotiques est un signal pour les macrophages qui vont alors l'éliminer.
Colorant bleu
Que met en évidence le colorant bleu utilisé ?
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Observation
Qu'est-ce que cette observation permet de mettre en évidence ?
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C'est tellement joli que ce serait dommage de s'en priver !
Remettre dans l'ordre les événements cytologiques observés au cours de l'apoptose
Condensation des cellules et perte de l'adhérence au support
Flip-flop de la phosphatidylsérine
Relargage du cytochrome c des mitochondries vers le cytoplasme
Fragmentation du noyau et bourgeonnement cellulaire
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