Les ADN polymérases sont caractérisées (dans l'ordre de la vidéo) par leur , leur , leur , leur et leur .
Comment définit-on rigoureusement la thermostabilité ?
résistance à des températures élevées
demi-vie longue à une température donnée
destruction par la température
Comment peut-on définir la processivité ?
Vitesse d'incorporation des nucléotides
Nombre de nucléotides qu'une polymérase peut incorporer avant de se dissocier de la matrice
Capacité de concentration d'une ADN polymérase
Quel paramètre conditionne la processivité d'une ADN polymérase ?
son affinité pour l'ADN
la séquence de l'ADN
Quelle propriété de l'ADN polymérase dépend directement de sa processivité ?
vitesse
fidélité
spécificité
Pour synthétiser un grand fragment d'ADN, on va utiliser
une polymérase peu processive (moins chère)
une polymérase très processive
ce qu'on a sous la main
Quelle propriété de l'ADN polymérase lui permet d'augmenter la fidélité de la PCR ?
polymérase 5'-3'
exonucléase 5'-3'
exonucléase 3'-5'
Pour une PCR de routine au laboratoire on utilise
une ADN polymérase haute fidélité
une ADN polymérase basse fidélité
Comment se traduit un manque de spécificité de la PCR sur un gel d'électrophorèse ?
des bandes plus fines
des bandes plus épaisses
des bandes plus nombreuses
Quelle pourrait être la cause d'un manque de spécificité de la PCR ?
une polymérase qui se positionne n'importe où
des amorces qui se fixent de façon non spécifique
une polymérase qui fait des erreurs d'incorporation
Dans quelle condition de température d'hybridation la spécificité est-elle la meilleure ?
à température basse
à température élevée
Afin d'augmenter la spécificité de la PCR, les laboratoires ont développé de nouvelles polymérases. Quelle caractéristique présente la polymérase Hot-start présentée ?
Elle n'est active que si l'amorce est correctement appariée
Elle n'est pas active à température ambiante
(inutile de regarder)