PCR vs qPCR
Quelle est la caractéristique de la qPCR qui la distingue de la PCR traditionnelle ?
Propriété du SYBR Green
Dans quelle condition le SYBR Green fluoresce-t-il le plus ?
Application
La qPCR enregistre la fluorescence émise à chaque cycle. A quelle phase du cycle va-t-on mesurer la fluorescence du SYBR Green ?
to quench = éteindre en anglais.
Dans le contexte de la qPCR, un quencher est une molécule qui "éteint" la fluorescence en absorbant la fluorescence émise par le fluorophore lorsqu'il se trouve à proximité
Propriété Taq polymérase
Outre sa fonction ADN polymérase 5'-3', quelle activité de la Taq polymérase est requise pour la détection à l'aide d'une sonde Taqman ?
Conséquence
Quelles conséquences va avoir cette activité exonucléase 5'-3' de la polymérase ?
Application
La qPCR enregistre la fluorescence émise à chaque cycle. A quelle phase du cycle va-t-on mesurer la fluorescence par la méthode TaqMan ?
Détection de la fluorescence
Afin de détecter la fluorescence à chaque cycle, un appareil de qPCR doit coupler un thermocycleur à
Que se passe-t-il au cours de chacune des phases
doublement détectable de la fluorescence émise à chaque cycle amplification insuffisante pour que la fluorescence émise se distingue du bruit de fond arrêt de l'amplification lié à l'épuisement des réactifs et/ou à l'effet inhibiteur de l'accumulation d'ADN Plus d'éléments à catégoriser | | |
Cq et abondance relative d'une séquence dans un échantillon
La détermination de la valeur Cq peut être utilisée pour estimer l'abondance relative de la séquence cible.
Si Cq1<Cq2 ; que peut-on dire de l'abondance de la cible dans les échantillons 1 et 2 ?
Cq et quantification absolue d'une séquence dans un échantillon
Comment faire pour déterminer précisément l'abondance d'une séquence cible dans un échantillon ?
La qPCr est un outil de choix pour quantifier l'expression d'un gène en quantifiant le nombre de copies d'un ARN donné dans un type cellulaire
Quand on veut quantifier les ARN, quelle étape préalable doit-on effectuer avant la qPCR ?