Les éléments possibles d'un plasmide

Ori

Origine de réplication bactérienne

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

Amp^R

Gène de résistance à l'ampicilline (beta-lactamase)

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

MCS

Site de Clonage Multiple

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

LacZ

Gène de la beta-galactosidase

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

CEN/ARS

Origine de réplication et centromère de levure

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

URA3

Gène de l'enzyme de biosynthèse de l'uracile

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

Promoteur

Site d'initiation de la transcription

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

Terminateur

Terminaison de la transcription

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

RBS

Site de fixation du ribosome (Ribosome Binding Site)

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine

6xHis = His-Tag

Etiquette Histidine

Criblage blanc/bleu des bactéries recombinantesExpression du gène clonéInsertion d'un ADN d'intérêtMultiplication chez E.coliMultiplication chez la levurePurification de la protéine d'intérêt par chromatographie d'affinitéSélection des bactéries transforméesSélection des levures transforméesTraduction du gène d'intérêt en protéine